第三步： 冰箱冷藏
試劑和DNA樣本充分混合
取樣完成后，要將DNA 的提取物放到冰箱冷藏備用。等提取物冷卻后，再拿出一個更小的試管，這個新試管當中有從試劑盒中調配的試劑。
這是最為費錢的一步，因為試劑盒是進口的，每次加入的試劑費用就要數百元。在進入加樣區之前，實驗人員先是打開了紫外線消毒燈?！艾F在要對整個房間進行消毒，確保加樣房間沒有任何的病菌及粉塵等，實驗者也盡量不要說話?！?實驗人員提醒道。
試劑里邊包括酶、引物等試劑，每個試管要加入0.2微升。加入試劑后，要將小試管放入小的混合器，讓試劑和DNA樣本充分混合。
第四步：擴增
DNA提取物不斷繁殖分裂
為了能達到檢測需求的量，要把小試管放入一個叫做擴增儀的儀器。把試管放入擴增儀后，里邊的DNA提取物將不斷繁殖、分裂。
在一般情況下，經過2-3個小時的擴增，DNA提取物的量就能達到檢測量。也就是說，要真正進行DNA 檢測、比對了。
第五步：檢測
提取16個位點數據進行比對
檢測是在一個叫做310熒光自動測序儀當中進行的，這種設備非常先進，把擴增完的小試管放入儀器后，設備會自動從試管中提取DNA提取物，然后自動選擇DNA位點，分析染色體。在一般情況下，設備會自動提取16個位點，然后，系統自動將需要做親子鑒定的兩個樣本進行自動比對。
根據遺傳學原理，如果所有的位點遺傳信息都能匹配成功，我們也就能大概說，這對父子或者母子是親子關系。即便有一兩個位點不能成功匹配，在一般情況下，也能作出否定的結論?！懊總€人都會有兩條染色體，一條是父親給予的，另一條是母親給予的。在同一個點位上也會出現兩條相同的數值，一個數值來自母親，另一個數值來自父親。如果孩子有的數值父親和母親的都沒有，那么他們就很有可能不是親子關系?！碑斎?，這是最簡單、最直觀的看法，要判斷孩子是否是親生，還要經過更加嚴謹的計算。
計算時，有個親權指數 (PI) 計算，因為在該公式類似于（p除以p+1）的模式，這個模式決定其結果不可能是整數。而且，因為世上沒有絕對相同的DNA，因此大概只能算出約99.9%的準確率。
